PCR Purification Kit PCR

产物纯化回收试剂盒

目录号:43012

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15 ~ 25℃）

产品特点:

1. 快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需 15 分钟。

2. 高效：每个离心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段，回收效率在 85%以上。

注意事项：

1.   {C}{C}Buffer BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后 2 个月内，不用做柱平衡。

2.  使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
3. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

操作步骤:

第一次使用前，请先在 Buffer WB 中加入无水乙醇，并打对勾标记，加入体积请参照瓶上的标签。

从 PCR 反应液或酶切反应液中回收 DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul 平衡液Buffer BL，12,000 rpm 离心 1 min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

2.   加结合液：估计PCR 反应液或酶切反应液的体积，向其中加入 5 倍体积溶液 Buffer DB，充分混匀。

（如果样本体积小于 100ul,用灭菌水补齐 100ul,以提高回收效率。）

3.吸附：将上一步所得溶液加入一套吸附柱中，室温放置 1 min，12,000 rpm 离心 1 min，弃滤液。

（ 注意：吸附柱容积为 750ul，若样品体积大于 750ul 可分批加入）

4.漂洗：加入 600ul Buffer WB，12,000 rpm 离心 1 min，弃滤液。

5.  二次漂洗：重复操作步骤 4。

6.    干燥：将离心吸附柱于 12,000 rpm 离心 2 min，甩干残留漂洗液。

7.   {C}洗脱：将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 离心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脱液Buffer EB，室温放置 2 min。12,000 rpm 离心 1 min 收集 DNA 片段。

（注意：为增加回收效率，可将洗脱液在 60℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置 2 min，再次离心收集。）