PCR Purification micro Kit

微量 PCR 产物纯化回收试剂盒

目录号:43017

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15 ~ 25℃）

产品简介：

本试剂盒为超微量 PCR 产物浓缩回收的专用试剂盒。适用于微量 PCR 反应产物纯化回收、酶切产物 DNA 片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA 样品浓缩等。使用本产品可回收 100bp-5kb 大小的DNA 片段，回收率可达 85%-95%。该试剂盒操作简便，得到的 DNA 片段可用于酶切、连接、测序等实验。

产品特点：

1.         特殊微量 5μg 离心柱设计可以最低 5μl 洗脱，保证了回收 DNA 的高浓度。

2.        特殊无垫圈离心柱的设计，最大限度减少了无液体残留和污染，保证了回收 DNA 的高纯度。

3.        快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需 15 分钟。

注意事项：

1.   Buffer BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后 2 个月内，不用做柱平衡。

2.使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。

3.   回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

操作步骤：

第一次使用前，请先在 Buffer WB 中加入无水乙醇，并打对勾标记，加入体积请参照瓶上的标签。

从 PCR 反应液或酶切反应液中回收 DNA 片段

1.    柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 50 ul 平衡液Buffer BL，12,000 rpm 离心 1 min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

2.        加结合液：每 20 ul PCR 反应液或酶切反应液的体积，加入 100 ul 结合液Buffer DB，充分混匀。

（注意：处理样品体积：溶胶结合液体积=1:5）

3.        吸附：将上一步所得溶液加入一套微量吸附柱中，室温放置 1 min，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

（ 注意：吸附柱容积为 750ul，若样品体积大于 750ul 可分批加入）

4.        漂洗：加入 300ul Buffer WB，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

5.        二次漂洗：重复操作步骤 4。

6.   干燥：将吸附柱放回收集管中， 12,000 rpm 离心 2 min，甩干膜上残留的乙醇，防止其抑制下游反应。

7.        洗脱：将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 离心管中，在微量吸附柱的膜中央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗脱液 Buffer EB，室温放置 1 min，12,000 rpm 离心 1 min。

（注意：为增加回收效率，可将洗脱液在 65℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置 1 min，再次离心收集。）