DNA Purification micro Kit

微量 DNA 浓缩回收试剂盒

目录号:43016

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15 ~ 25℃）

产品简介:

本试剂盒为超微量 DNA 浓缩回收的专用试剂盒。适用于微量 DNA 的琼脂糖凝胶 DNA 回收、PCR 反应产物纯化回收、酶切产物 DNA 片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA 样品浓缩等。使用本产品可回收 100bp-5kb 大小的 DNA 片段，回收率可达 85%-95%。该试剂盒操作简便，得到的DNA 片段可用于酶切、连接、测序等实验。

产品特点:

1.         特殊微量 5μg 离心柱设计可以最低 5μl 洗脱，保证了回收 DNA 的高浓度。

2.        特殊无垫圈离心柱的设计，最大限度减少了无液体残留和污染，保证了回收 DNA 的高纯度。

3.        快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需 15 分钟。

注意事项:

1.  Buffer BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后 2 个月内，不用做柱平衡。

2. 使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。

3. 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对 DNA 造成损伤。

4.  回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

操作步骤:

第一次使用前，请先在 Buffer WB 中加入无水乙醇，并打对勾标记，加入体积请参照瓶上的标签。

一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段

1.  柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 50 ul Buffer BL，12,000 rpm 离心 1 min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

2.  切胶：在长波紫外灯下，用干净刀片将目的 DNA 条带切下，尽量切除不含 DNA 的凝胶。

3.    称重：将切下的含有目的 DNA 条带的凝胶，放入 1.5 ml 离心管中，称取凝胶重量（去除空管重量）。如果凝胶重量为 100mg，其体积可视为 100ul。

4.    溶胶：加入 3 倍体积 Buffer DB，56℃水浴，直到凝胶完全溶解，期间颠倒混匀 2 次加速溶胶。

（如果凝胶浓度大于 2%，应加入 6 倍体积 Buffer DB。对于回收<100 bp 的小片段，可在凝胶完全溶解后，再加入 1.5 倍胶块体积的异丙醇以提高回收率。）

5. 吸附：待溶液冷却至室温后加入吸附柱中，室温静置 1 min，然后 12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

（如果总体积超过 750 ul，可分 2 次将溶液加入同一离心吸附柱中）

6.   漂洗：加入 300 ul 漂洗液Buffer WB，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

7.    二次漂洗：重复操作步骤 6。

8.   干燥：将吸附柱放回收集管中， 12,000 rpm 离心 2 min，甩干膜上残留的乙醇，防止其抑制下游反应。

9.   回收：将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 离心管中，在微量吸附柱的膜中央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗脱液Buffer EB，室温放置 1 min，12,000 rpm 离心 1 min。

（注意：为增加回收效率，可将洗脱液在 65℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置 1 min，再次离心收集。）