DNA/RNA Kit for Virus Detection
检测用病毒核酸（DNA/RNA）提取试剂盒
目录号：91517
产品内容
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产品成份 |
91517-50（50 次） |
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裂解液 VLB |
20 ml |
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Poly Carrier |
200 μl |
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去蛋白液 RE |
25 ml |
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漂洗液 RW |
10 ml（需加入指定量无水乙醇） |
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蛋白酶 K 溶液 |
1 ml |
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RNase-Free ddH2O |
10 ml |
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RNA 吸附柱和收集管 |
50 套 |
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RNase-Free 1.5ml 离心管 |
50 支 |
自备试剂
无水乙醇
保存条件
Poly Carrier 置于-20℃保存，其他组分置于室温（15 ~ 25℃）保存。
产品简介
本试剂盒适用于动物组织、血浆、血清、淋巴液、培养上清、分泌物、拭子、粪便、牛奶、尿液等样品中病毒核酸的提取，可同时提取样本中的DNA 和 RNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度病毒核酸。提取的病毒 RNA/DNA 纯度高，质量稳定可靠，可直接适用于 PCR、RT-qPCR分析。
产品特点
1. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在 20 min 内完成;
2. 应用广泛：可提取多种不同的液体样本。
注意事项
1. Poly Carrier：
如果起始处理量很少，我们推荐使用 Poly Carrier，如果预期有较大量
核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入 Poly Carrier。
2. Poly Carrier 的使用方法：在每个样品提取所需裂解液 VLB 中加入 4 μl Poly Carrier，将裂解液 VLB 与 Poly Carrier 溶液充分颠倒混匀即可(裂解液 VLB 容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液 VLB 中加入总共需要的 Poly Carrier 混匀备用。混合液在室温 24 小时内稳定。
操作步骤
提示：
第一次使用前，请先在漂洗液 RW 瓶中加入无水乙醇，请参照瓶上的标签。
操作前，请将样品平衡至室温。
所有离心步骤均需要在室温下进行。
1. 无细胞体液（例如：血浆/血清/淋巴液/无细胞体液/细胞培养上清液/
尿液）：
a. 200μl 血清等体液（需回复到室温，不足可用 0.9% NaCl 或者 PBS补足）转入 1.5ml 离心管，加入 400μl 裂解液 VLB， 立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。
b. 室温(15-25℃)放置 10 min。
c. 加入 450μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。
注意：如果周围环境高 30℃，乙醇需要再在冰上预冷后再加入。
d. 立刻接操作步骤的步骤 5。
2. 粪便样品：
a. 取 500μl 0.5-1 ml 粪便样本悬浮于 5 ml 生理盐水中，彻底涡旋振荡混匀后，4,000×g (6,000 rpm)离心20min后取上清200μl 转入 1.5ml离心管，加入400μl 裂解液VLB， 立刻涡旋振荡15sec 充分混匀。
b. 室温(15-25℃)放置 10 min。
c. 加入 450μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。
d. 立刻接操作步骤的步骤 5。
3. 鼻拭子/咽拭子：
a. 理盐水或病毒运输液彻底颠倒或涡旋振荡混匀后取 200 μl 转入1.5 ml 离心管，加入 400 μl 裂解液 VLB， 立刻涡旋振荡 15 sec充分混匀。
b. 室温 (15-25℃) 放置 10 min。
c. 加入 450 μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。
d. 立刻接操作步骤的步骤 5。
4. 组织样本（气管、肺、喉头、脾脏、扁桃体、法氏囊、肾脏和淋巴结
等）:
a. 变明显的组织块剪取样品约 20 mg（备注：A.可选择多部位剪碎混匀后再取。B.一粒大米重约 20 mg。C.请勿使用过量组织，影响提取效果），依次加入 150 μl 裂解液 VLB、450 μl 实验室纯水或者去离子水（不用灭菌）和 20μl 蛋白酶 K，用眼科剪反复多次剪
碎混匀或用电动匀浆器匀浆，置 56℃水浴中消化 15-30 min（视消化情况）后瞬时离心取上清。
b. 将上述处理后样本离心取上清 100 μl 转入 1.5 ml 离心管，加入300 μl 裂解液 VLB，立刻涡旋振荡充分混匀。
c. 加入 250 μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡 15 sec 充分混匀。
d. 立刻接操作步骤的步骤 5。
5. 每次转移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中，12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。吸重复此过程，直到溶液全部上柱。
6. 向吸附柱内加入 500 μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。
7. 向吸附柱内加入 500 μl 漂洗液 RW，12,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。
（注意：漂洗液 RW 中按要求加入无水乙醇，用后立即盖紧瓶盖，以防乙醇挥发）
8. 可选步骤：重复步骤 6 一次。
9. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 离心 2min，甩干膜上残留
的乙醇。
10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管中，加入 30 ~ 50 ul 的RNase-Free ddH2O 洗脱，室温放置 1 min。12,000 rpm 离心 1 min，管底即 RNA 溶液。
（注意：如要提高 RNA 浓度，可将得到的溶液重新加到吸附柱中，室温放置 1 min，
再次离心收集）
11. 病毒 DNA 可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃。病毒 RNA 建议最好立刻使用，否则立刻短期放置在-70℃备用。
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