FlashPure Plant Genomic DNA Kit
高效植物基因组 DNA 提取试剂盒
(离心柱型)
目录号:40200
产品内容:
产品成份 |
40200-50(50 次) |
40200-200(200 次) |
Buffer LP1 |
20 ml |
80 ml |
Buffer LP2 |
7 ml |
26 ml |
Buffer LP3 |
15 ml |
50 ml |
Buffer WB2 |
13 ml |
50 ml |
Buffer EB |
10 ml |
20 ml |
RNase A (10mg/ml) |
250 ul |
1000 ul |
DNA 吸附柱和收集管 |
50 套 |
200 套 |
自备试剂:
无水乙醇
保存条件:
室温(15 ~ 25℃)
产品简介:
适用于从多种植物的不同部位的组织中快速提取高质量的基因组DNA,独特配方的缓冲液体系能有效去除植物组织中的多糖、多酚复合物和酶抑制剂,基因组DNA选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心等步骤,去除其他杂质。提取过程不需要氯仿等有机试剂抽提,安全快捷。使用本Kit提取的植物基因组DNA,可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。
产品特点:
1. 简便快速:30 min 内可获得高纯度的基因组 DNA。
2. 纯度高:OD260/280=1.7~1.9,可直接进行PCR、酶切和杂交等实验。
3. 安全无毒:安全、无毒,无需苯酚/氯仿抽提。
注意事项
1. 若Buffer LP1或Buffer LP3有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用。
2. 所有离心步骤均需要使用台式离心机,室温下离心。
3. 按要求在Buffer LP3和Buffer WB2中加入无水乙醇。
操作步骤:
第一次使用前,请先在 Buffer LP3 和 Buffer WB2 中加入指定量无水乙醇,加入体积详见瓶身的标签。
1.取植物新鲜组织 100mg 或干重组织 20mg,加入液氮充分碾磨,倒入
1.5ml 离心管中。
2. 加入 400μl Buffer LP1 和 4μl RNase A(10mg/ml),旋涡振荡 1min,室温放置 10min。
3. 加入 130 μl Buffer LP2,充分混匀,旋涡振荡 1 min。
4.12,000 rpm 离心 5 min,将上清移至新的离心管中。
(注意:只取上清液,不要吸取沉淀组织,大约 400μl 左右)
5. 加入 1.5 倍体积的 Buffer LP3(例:400μl 上清液加 600μl Buffer LP3),立即充分振荡混匀 15 sec,此时可能会出现絮状沉淀。
6.将上一步所得溶液和絮状沉淀(每次≤700μl)转入到吸附柱中,
12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液,此时 DNA 被吸附在膜上。重复此过程,直到所有溶液全部上柱。
7. 向吸附柱内加入 500μl 的 Buffer WB2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中废液。
(注意:如果吸附柱膜呈现绿色,可向吸附柱中加入 500μl 无水乙醇,
12,000 rpm 离心 30 sec,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中)
8. 重复步骤 7 一次。
9.室温 12,000 rpm 离心 2 min,甩干吸附膜上的残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
10. 取出吸附柱,放入一个新的 1.5ml 离心管(自备)中,在吸附膜的中央加入 50~100μl Buffer EB,室温放置 2 min,12,000 rpm 离心 1 min,管底溶液即基因组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液 Buffer EB 在 60℃预热。如果需要使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 ~ 8.5 之间,为了增加 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置 2 min,再次离心收集)
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